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糖類不僅在生命活動過程中起著重要的作用，還廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)，制藥，發(fā)酵和食品等行業(yè)。

一、單糖的結(jié)構(gòu)
        單糖是一類手性多羥基醛或多羥基酮化合物。葡萄糖是最常見的糖類化合物，其結(jié)構(gòu)式如下：

二、寡糖和多糖

         單糖通過苷鍵連接生成糖鏈，根據(jù)單糖的數(shù)目，稱為寡糖或多糖，寡糖和多糖沒有明確的界限，一般認為寡糖由2-10個單糖組成，多糖由10個以上單糖組成。

三、糖類分析方法

         糖類物質(zhì)的分析手段有很多，如，液相色譜（HPLC），離子色譜（IC），氣相色譜法（GC）和 高效毛細管電泳法（HPCE）等，高效液相色譜法是目前糖類物質(zhì)分析最常用的手段。

         糖類化合物具有多羥基結(jié)構(gòu)，分子極性大，使用常規(guī)的反相保留模式（如C18）很難保留，因此在液相色譜中一般采用其它保留模式進行糖的分離。

        1. 氨基柱

            氨基柱的官能團是氨丙基，由于對糖有較高的分離效率，因此很多標準方法（如 GB 5009.8-2016 食品安全國家標準 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測定）均推薦使用氨基柱和示差折光檢測器進行五種糖的分離。

          下圖為ACE 氨基色譜柱分離五種糖的譜圖

            色譜柱：ACE EXL 5 NH2  5μm，4.6 ? 250mm（PN：ACETEXL-1214-2546U）

            流動相：乙腈：水=80  ：20 v/v

            流速：3mL/min

            進樣量：20μL

            柱溫：40℃

            檢測器：示差折光檢測器，35℃

            樣品：果糖，葡萄糖，蔗糖，麥芽糖，乳糖，濃度均為 5mg/mL

1-果糖     2-葡萄糖    3-蔗糖     4-麥芽糖     5-乳糖

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        2. Waters 酰胺基色譜柱（BEH Amide）

            基于沃特世新穎的BEH雜化硅膠顆粒技術(shù)，BEH Amide色譜柱使用化學(xué)穩(wěn)定耐受的、三鍵鍵合的酰胺基(Amide)鍵合相，從根本上解決了氨基鍵合硅膠柱不能耐受高pH和鍵合相流失嚴重的問題，柱壽命大大延長，同時避免了氨基柱和糖形成Schiff堿的問題。

             色譜柱：Xbridge BEH Amide  3.5μm，4.6 ? 250mm（PN：186004870）

             流動相：75：25乙腈：水+0.2%三乙胺

             流速：1.0 mL/min

             進樣量：15μL

             柱溫：35℃

             檢測器：示差折光檢測器

             樣品：果糖，葡萄糖，蔗糖，麥芽糖，乳糖

 1-果糖     2-葡萄糖    3-蔗糖     4-麥芽糖     5-乳糖

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       3. 配體交換/體積排阻色譜柱

           色譜柱采用表面磺化的聚苯乙烯-二乙烯苯樹脂填裝而成，樹脂表面可結(jié)合多種離子 (H+，Ca2+，Pb2+，Na+，K+)。 分離機制包括離子排阻、配體交換、尺寸排阻、反相等多種相互作用模式，采用簡單的等度方法即可為糖和有機酸    提供不同于氨基柱的獨特的分離能力。 

          據(jù)粗略統(tǒng)計，各國藥典和食品安全國家標準有幾十種方法推薦使用液相色譜方法進行糖的分析，如《GB/T 20880-2018 食用葡萄糖》，2020版中國藥典《海藻糖 》含量和有關(guān)物質(zhì)的測定等。

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